PRRS病毒主要受体蛋白CD151和CD163真核表达载体的构建

• 作 者: 阮征 李杰 刘开武 王莲芳 华娟 胡小明 刘杰 黄海军
• 机 构: 武汉市畜牧兽医科学研究所,武汉市重大动物疫病防控中心,华中农业大学猪遗传育种农业部重点实验室&,农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,武汉市畜牧兽医局
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2014年12期
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 CD151分子 CD163分子 真核表达载体 细胞转染 Porcine reproductive and respiratory syn
• 基金项目: 国家自然科学基金项目（31201938）, 武汉市科技局项目（2013020705070350-9,2013020705070350-14）, 武汉市农科院创新项目（CX201309）, 武汉市农科院青年英才项目（YC201101）

为了进一步研究PRRSV与细胞受体之间的相互作用机理,通过基因工程方法从PAM细胞中克隆获得了CD151和CD163全长编码片段,利用Sal I和Kpn I内切酶对回收得到的CD151（762 bp）和CD163（3 333 bp）DNA片段进行酶切,构建了p IRES2-EGFP-CD151和p IRES2-EGFP-CD163真核表达载体。经PCR和酶切鉴定后,分别提取重组质粒进行细胞转染。荧光显微镜下可见单独转染CD151和CD163基因或CD151/CD163共转染的Marc 145细胞表达强烈的