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目的建立并比较全国不同产地10批鲜马齿苋样品的HPLC指纹图谱,为考察鲜马齿苋的质量及其相关产品开发提供依据。方法采用高效液相色谱法,构建鲜马齿苋指纹图谱,色谱柱为Kromasil C18柱（5μm,250mm×4.6mm）,流动相为乙腈甲醇（7∶3）-0.1%甲酸水进行梯度洗脱;进样量20μL,检测波长为320nm,柱温30℃,流量1mL·min-1。使用中药色谱相似度评价系统与SPSS软件分别进行相似度和系统聚类的分析。结果确定了鲜马齿苋指纹图谱中的11个共有峰,峰3咖啡酸为参照峰,相似度评价结果差异较大。聚类分析结果发现廊坊和石家庄归为一类;滨州与红河归为一类;成都和眉山归为一类;洛阳归为一类,其余的可以归为一类。结论不同产地的鲜马齿苋成分、含量差异很大,该方法在一定程度上为今后的鲜马齿苋的应用和研究提供了依据。