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摘要：HPLC法也叫做高效液相色谱法，该方法在检测农产品药残中的应用十分广泛，是保障农产品质量安全的重要手段。近年来，随着HPLC法的完善，其自动化水平以及所应用的仪器设备性能更高，因此检测结果的准确性也随之大幅度提升。但是受多方面因素的影响，检测误差依然存在，主要一种在样品前处理过程之中。基于此，本文分析了影响HPLC法测定农产品药残结果的主要因素，并对降低检测误差的相关措施提出建议，仅供大家参考。
关键词：HPLC法;农产品药残;影响因素;建议
引言：HPLC法具有灵敏度高以及自动化水平高等方面的特点，因此在农产品药残测定过程中的应用十分广泛。但是在HPLC法的应用过程中会受到多方面因素的干扰，影响测定结果的准确性。虽然在新技术以及新设备的支持下，检测误差几率大幅度降低，但是在抽样以及样品前处理及标准品配置等方面依然容易出现误差。针对这种情况，需要我们全面分析相关的影响因素，并积极探索更加有效的措施，提升HPLC法的应用效果。
1抽样与杨平前处理过程中的影响因素分析
1.1抽样过程中的影响因素
农产品是一个广泛的概念，不单单指种植业产品，而且还包含着动物产品以及微生物产品等，因为农产品种类繁多，使得抽样工作更具复杂性，并且抽样的数量以及抽样的方法等都会对最终的测定结果产生影响。针对不同的农产品有着不同的抽样标准方法，除此之外，抽样所应用的器皿、抽样的時节以及杨平的封存、储运等也会对最终的分析结果产生重要影响。
1.2样品预处理过程中的影响因素
样品备制以及对样品中待测物质进行提取、净化等环节统称为样品前处理，进行样品前处理，可以消除基质干扰，有助于提升分析结果的可靠性与准确性。在应用HPLC法进行农产品药残测定过程中，样品前处理是重要环节之一，并且会占用绝大部分时间，同时大约有60%左右的实验误差均产生在该阶段。由此可见，样品前处理过程是影响HPLC法测定结果的主要因素。具体来讲，其影响因素主要包括以下几个方面：
首先，样品备制过程中的影响因素。对样品的粉碎、缩分等环节统称为样品备制，其中各个环节所应用方法是否正确是影响检测结果的主要因素。例如样品的粉碎度不达标，样品粒度过大，则会影响到提取率。
其次，分离提取中的影响因素。在样品分离提取过程中需要应用到提取剂，而提取的方法、提取剂的纯度以及提取过程中的温度等均会对最终的检测结果产生影响。最后，提取溶剂方面的影响。要结合不同的样品合理选择提取溶剂，如果提取溶剂选择不当，则必然会对检测结果造成不利影响。与此同时，应用不同性质的提取剂也会产生不同的提取效果。以乙烷为例，如果提取的样品中脂肪以及色素的含量不高，则乙烷能够发挥有效的作用，但是应用乙烷进行提取的提取率则相对较低。再以丙酮为例，应用丙酮进行提取，可以实现对大部分农药的溶解，但是在此过程中也会溶解大量的色素和油脂，这会给后续的净化工作带来不利影响。由此可见，提取溶剂会对检测结果产生较大的影响，在应用HPLC法测定农产品药残过程中，应结合样品的特点和性质，合理选择提取溶剂。
除了以上影响因素之外，提取方式也是重要影响因素之一。在农药残留提取过程中，所应用的方法有多种，以往以液液分配萃取、固液萃取以及沉淀、离心等方法为主。传统提取方法存在多方面的弊端与不足，如工作量大，所应用的有机溶液较多，容易造成环境污染，并且传统提取方法效率低，误差率高。为此，在传统提取方法的基础上，开发研制了新型提取方法，如固相萃取法、膜萃取法、加速溶剂提取法等，新型提取方法的作用更为显著，提取效果更佳，但是新型提取方法所需的仪器设备较多，因此成本高，同时还对操作人员提出了更高的要求。在提取方法的选用过程中，应结合被测药物的性质以及检测标准等，但受操作人员技术水平以及资金等因素的限制，往往只能采用成本较低的提取方法，这种现象在县、乡的农残检测过程中表现得尤为突出。提取方法受限，避免会对提取效果以及最终的检测结果等产生影响。另外，提取温度也是主要影响因素之一，特别是酶促反应，温度低反应不完会，导致提取率及检测结果低，甚至出现假阳性或检测失败，温度过高影响酶活性可能导致假阴性率提高。
最后，净化浓缩过程中的影响因素。针对待测物的净化，应保障净化剂的纯度，否则将会严重影响净化效果。另外净化剂的选择也会对净化结果产生重要影响，净化剂选择不当也会对净化结果产生不利影响。而对于浓缩而言，在浓缩过程中所应用的方法，以及浓缩过程中的温度以及压力等也是重要的影响因素。
2应用HPLC法测定农产品药残的建议
2.1规范抽样操作
要结合相关标准要求规范抽取受检样品，并在样品的运输和储存环节结合样品的性质合理选择方式方法。要确保各个环节中样品不会遭受污染、不会发生变质等情况。与此同时还要保证样品的原始性、代表性，这样才能为后续的检测工作奠定基础。
2.2加强检测过程的温度把控
鉴于上文分析可知，温度是影响HPLC法测定农产品药残结果的主要因素之一，因此在检测过程中应加强对温度的把控。要将实验室温度控制在18-25摄氏度范围之内，具体来讲，温度控制应在保证样品与待测物性质尽可能完好的前提下，获得尽可能高的提取率和工作效率。
2.3科学选用检测试剂
为提升溶解度，检测试剂的选用应确保其与待测物及其代谢物极性相近。要想达到理想效果，在选用检测试剂过程中，应结合试样的状况以及溶剂的性质等方面因素，同时还要注重试剂的纯度以及试剂的挥发性等方面的因素。为进一步提升提取效率，在待测物提纯过程中，可以采用多种提取剂混合应用的方式，甚至结合实际情况还可以在提取剂中适量加入无机盐，这些方式都有助于提升提取效率。另外，还要确保试剂的纯度，通常情况下，进口试剂的纯度更高，但是需要加大的成本投入，而国产试剂虽然价格更加亲民，但是其纯度不足。通常情况下，在应用国产试剂的时需要对其进行净化处理才能应用。
2.4科学选用操作方法
在提取过程中，应结合待测物的性质以及成本投入等因素合理选用提取方法，所选用的提取方法不能导致待测物出现氧化、变形以及分解等现象，以免影响提取效果。另外，在净化以及浓缩等环节也要科学选用操作方法，要结合萃取剂的溶解性以及自身的性质，同时还要充分考虑待测物以及基质组分的性质等，在此基础上才能保障所选用的方法的科学性。
结束语：HPLC法是主要的测定农产品药残的方法之一，在保障农产品质量安全方面发挥着十分重要的作用。但在HPLC法的应用过程中依然会受到多方面因素的影响，导致检测结果缺乏可靠性，需要我们积极探索更加有效的措施来规避不利影响因素，保障HPLC法的作用发挥，提升测定结果的准确性。
参考文献：
[1]汤彩云，王涛，屠洁，刘冠卉，黎鹏，赵静. 比色法与HPLC法对比测定桑叶茶中γ-氨基丁酸的含量[J]. 食品科学，2018，39（24）：256-260.
[2]王棘，潘雪妍，杨宏伟. HPLC法和氨基酸分析仪（AAA）法测定肠外营养注射液（25）中18种氨基酸的含量的比较[J]. 药物分析杂志，2012，32（06）：1085-1089.
[3]石林娟，曹磊，宋玉，王健，刘超，李珂昕. HPLC法和Berthelot比色法测定发芽糙米中γ-氨基丁酸的含量[J]. 粮食与饲料工业，2015，（01）：61-65.
关键词：HPLC法;农产品药残;影响因素;建议
引言：HPLC法具有灵敏度高以及自动化水平高等方面的特点，因此在农产品药残测定过程中的应用十分广泛。但是在HPLC法的应用过程中会受到多方面因素的干扰，影响测定结果的准确性。虽然在新技术以及新设备的支持下，检测误差几率大幅度降低，但是在抽样以及样品前处理及标准品配置等方面依然容易出现误差。针对这种情况，需要我们全面分析相关的影响因素，并积极探索更加有效的措施，提升HPLC法的应用效果。
1抽样与杨平前处理过程中的影响因素分析
1.1抽样过程中的影响因素
农产品是一个广泛的概念，不单单指种植业产品，而且还包含着动物产品以及微生物产品等，因为农产品种类繁多，使得抽样工作更具复杂性，并且抽样的数量以及抽样的方法等都会对最终的测定结果产生影响。针对不同的农产品有着不同的抽样标准方法，除此之外，抽样所应用的器皿、抽样的時节以及杨平的封存、储运等也会对最终的分析结果产生重要影响。
1.2样品预处理过程中的影响因素
样品备制以及对样品中待测物质进行提取、净化等环节统称为样品前处理，进行样品前处理，可以消除基质干扰，有助于提升分析结果的可靠性与准确性。在应用HPLC法进行农产品药残测定过程中，样品前处理是重要环节之一，并且会占用绝大部分时间，同时大约有60%左右的实验误差均产生在该阶段。由此可见，样品前处理过程是影响HPLC法测定结果的主要因素。具体来讲，其影响因素主要包括以下几个方面：
首先，样品备制过程中的影响因素。对样品的粉碎、缩分等环节统称为样品备制，其中各个环节所应用方法是否正确是影响检测结果的主要因素。例如样品的粉碎度不达标，样品粒度过大，则会影响到提取率。
其次，分离提取中的影响因素。在样品分离提取过程中需要应用到提取剂，而提取的方法、提取剂的纯度以及提取过程中的温度等均会对最终的检测结果产生影响。最后，提取溶剂方面的影响。要结合不同的样品合理选择提取溶剂，如果提取溶剂选择不当，则必然会对检测结果造成不利影响。与此同时，应用不同性质的提取剂也会产生不同的提取效果。以乙烷为例，如果提取的样品中脂肪以及色素的含量不高，则乙烷能够发挥有效的作用，但是应用乙烷进行提取的提取率则相对较低。再以丙酮为例，应用丙酮进行提取，可以实现对大部分农药的溶解，但是在此过程中也会溶解大量的色素和油脂，这会给后续的净化工作带来不利影响。由此可见，提取溶剂会对检测结果产生较大的影响，在应用HPLC法测定农产品药残过程中，应结合样品的特点和性质，合理选择提取溶剂。
除了以上影响因素之外，提取方式也是重要影响因素之一。在农药残留提取过程中，所应用的方法有多种，以往以液液分配萃取、固液萃取以及沉淀、离心等方法为主。传统提取方法存在多方面的弊端与不足，如工作量大，所应用的有机溶液较多，容易造成环境污染，并且传统提取方法效率低，误差率高。为此，在传统提取方法的基础上，开发研制了新型提取方法，如固相萃取法、膜萃取法、加速溶剂提取法等，新型提取方法的作用更为显著，提取效果更佳，但是新型提取方法所需的仪器设备较多，因此成本高，同时还对操作人员提出了更高的要求。在提取方法的选用过程中，应结合被测药物的性质以及检测标准等，但受操作人员技术水平以及资金等因素的限制，往往只能采用成本较低的提取方法，这种现象在县、乡的农残检测过程中表现得尤为突出。提取方法受限，避免会对提取效果以及最终的检测结果等产生影响。另外，提取温度也是主要影响因素之一，特别是酶促反应，温度低反应不完会，导致提取率及检测结果低，甚至出现假阳性或检测失败，温度过高影响酶活性可能导致假阴性率提高。
最后，净化浓缩过程中的影响因素。针对待测物的净化，应保障净化剂的纯度，否则将会严重影响净化效果。另外净化剂的选择也会对净化结果产生重要影响，净化剂选择不当也会对净化结果产生不利影响。而对于浓缩而言，在浓缩过程中所应用的方法，以及浓缩过程中的温度以及压力等也是重要的影响因素。
2应用HPLC法测定农产品药残的建议
2.1规范抽样操作
要结合相关标准要求规范抽取受检样品，并在样品的运输和储存环节结合样品的性质合理选择方式方法。要确保各个环节中样品不会遭受污染、不会发生变质等情况。与此同时还要保证样品的原始性、代表性，这样才能为后续的检测工作奠定基础。
2.2加强检测过程的温度把控
鉴于上文分析可知，温度是影响HPLC法测定农产品药残结果的主要因素之一，因此在检测过程中应加强对温度的把控。要将实验室温度控制在18-25摄氏度范围之内，具体来讲，温度控制应在保证样品与待测物性质尽可能完好的前提下，获得尽可能高的提取率和工作效率。
2.3科学选用检测试剂
为提升溶解度，检测试剂的选用应确保其与待测物及其代谢物极性相近。要想达到理想效果，在选用检测试剂过程中，应结合试样的状况以及溶剂的性质等方面因素，同时还要注重试剂的纯度以及试剂的挥发性等方面的因素。为进一步提升提取效率，在待测物提纯过程中，可以采用多种提取剂混合应用的方式，甚至结合实际情况还可以在提取剂中适量加入无机盐，这些方式都有助于提升提取效率。另外，还要确保试剂的纯度，通常情况下，进口试剂的纯度更高，但是需要加大的成本投入，而国产试剂虽然价格更加亲民，但是其纯度不足。通常情况下，在应用国产试剂的时需要对其进行净化处理才能应用。
2.4科学选用操作方法
在提取过程中，应结合待测物的性质以及成本投入等因素合理选用提取方法，所选用的提取方法不能导致待测物出现氧化、变形以及分解等现象，以免影响提取效果。另外，在净化以及浓缩等环节也要科学选用操作方法，要结合萃取剂的溶解性以及自身的性质，同时还要充分考虑待测物以及基质组分的性质等，在此基础上才能保障所选用的方法的科学性。
结束语：HPLC法是主要的测定农产品药残的方法之一，在保障农产品质量安全方面发挥着十分重要的作用。但在HPLC法的应用过程中依然会受到多方面因素的影响，导致检测结果缺乏可靠性，需要我们积极探索更加有效的措施来规避不利影响因素，保障HPLC法的作用发挥，提升测定结果的准确性。
参考文献：
[1]汤彩云，王涛，屠洁，刘冠卉，黎鹏，赵静. 比色法与HPLC法对比测定桑叶茶中γ-氨基丁酸的含量[J]. 食品科学，2018，39（24）：256-260.
[2]王棘，潘雪妍，杨宏伟. HPLC法和氨基酸分析仪（AAA）法测定肠外营养注射液（25）中18种氨基酸的含量的比较[J]. 药物分析杂志，2012，32（06）：1085-1089.
[3]石林娟，曹磊，宋玉，王健，刘超，李珂昕. HPLC法和Berthelot比色法测定发芽糙米中γ-氨基丁酸的含量[J]. 粮食与饲料工业，2015，（01）：61-65.