【摘 要】
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目的 研究微小核糖核酸(miR)-324-3p对体外培养的乳腺癌MCF-7细胞放射敏感性的影响并探讨其作用机制.方法 采用qRT-PCR法和Western blot法分别检测miR-324-3p、丝氨酸/苏氨酸
【机 构】
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海南医学院第二附属医院肿瘤外科,海南海口570311海南医学院第二附属医院放射科,海南海口570311;
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目的 研究微小核糖核酸(miR)-324-3p对体外培养的乳腺癌MCF-7细胞放射敏感性的影响并探讨其作用机制.方法 采用qRT-PCR法和Western blot法分别检测miR-324-3p、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)1蛋白的表达量;采用LipofectamineTM 2000介导,将过表达miR-324-3p模拟物、沉默和过表达AKT1质粒转染乳腺癌MCF-7细胞并联合4 Gy放射照射,应用克隆形成实验、CCK-8试剂盒、流式细胞术法检测细胞存活率、细胞活性、细胞凋亡率,并绘制单击多靶模型拟合曲线;利用TargetScan在线预测、荧光素酶基因报告试验及Western blot法验证miR-324-3p的靶向关系.结果 与正常乳腺上皮细胞MCF10A相比,乳腺癌MDA-MB-435S、MCF-7细胞中miR-324-3p的表达下调,AKT1蛋白表达上调(P均＜0.05).过表达miR-324-3p联合放射照射,MCF-7细胞放射敏感性增加,存活率呈剂量依赖性降低,细胞活性降低、凋亡率升高(P均＜ 0.05).miR-324-3p靶向调控AKT1的表达,当沉默AKT1联合放射照射时,MCF-7细胞放射敏感性增加,存活率下降并呈剂量依赖性,细胞活性降低、凋亡率升高(P均＜0.05).过表达AKT1逆转了miR-324-3p对乳腺癌放射敏感性、细胞增殖及凋亡的作用.结论 过表达miR-324-3p可以靶向调控AKT1的表达,增强乳腺癌MCF-7细胞的放射敏感性.
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