【摘 要】
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遗传转化是目前研究丝状真菌的重要技术策略.本研究建立并优化了农杆菌介导的葡萄灰葡萄孢遗传转化体系,使用农杆菌菌液将分生孢子稀释至1×105个/mL,涂布于含200μmol/mL乙酰丁香酮的共培养培养基上,于25℃共培养48 h,可达到最高的遗传转化效率.随机选取的8个转化子均可稳定遗传潮霉素抗性,且均能扩增得到hph基因特异片段,其中6个为单拷贝插入,说明该遗传转化体系较为理想,可用于今后开展葡萄灰葡萄孢基因功能解析.
【机 构】
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山东省葡萄研究院,山东 济南 250100;山东省农业科学院农产品加工与营养研究所,山东 济南 250100
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遗传转化是目前研究丝状真菌的重要技术策略.本研究建立并优化了农杆菌介导的葡萄灰葡萄孢遗传转化体系,使用农杆菌菌液将分生孢子稀释至1×105个/mL,涂布于含200μmol/mL乙酰丁香酮的共培养培养基上,于25℃共培养48 h,可达到最高的遗传转化效率.随机选取的8个转化子均可稳定遗传潮霉素抗性,且均能扩增得到hph基因特异片段,其中6个为单拷贝插入,说明该遗传转化体系较为理想,可用于今后开展葡萄灰葡萄孢基因功能解析.
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