【摘 要】
：
目的 构建含人β1转化生长因子(TGF-β1)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的复制缺陷型腺病毒载体.方法 通过聚合酶链式反应(PCR)法将带有TGF-β1 shRNA 序列构建至U6启动
论文部分内容阅读
目的 构建含人β1转化生长因子(TGF-β1)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的复制缺陷型腺病毒载体.方法 通过聚合酶链式反应(PCR)法将带有TGF-β1 shRNA 序列构建至U6启动子(U6sh TGF-β1)下游,与T载体连接,将质粒转化人大肠杆菌.将U6sh TGF-β1连到穿梭质粒pDC316上,与腺病毒基因组质粒pBHGlox△E1、3Cre共转染293T细胞,得到重组腺病毒载体(rAd TGF-β1).经PCR鉴定正确后,进行扩增、纯化、滴度测定及感染性鉴定.结果 PCR法得到目的 片段U6sh TGF-β1,经测序,序列与设计方案完全一致.rAd TGF-β1具有良好的感染性,腺病毒滴度可达107.3TCID50/ml.双引物PCR法鉴定Ad TGF-β1可扩增出腺病毒E2b区片段及特异性片段U6sh TGFβ1.结论 成功构建了能表达TGF-β1 shRNA 的重组腺病毒载体rAd TGF-β1(A)及对照载体rAdTGF-β1(B),可能为临床应用RNA干涉--新的基因技术防治瘢痕疙瘩提供高效的方法.
其他文献
目的 评价雾化吸入硝酸甘油(nitroglycerin,NTG)治疗新生儿缺氧性肺动脉高压的疗效. 方法 选择室息缺氧后发生肺动脉高压的新生儿33例,给予雾化吸入NTG,利用三尖瓣反流或动脉
目的 总结结直肠癌致急性肠梗阻的急诊治疗体会.方法 回顾性分析1996年10月至2006年10月收治的78例结直肠癌致急性肠梗阻患者的病例资料.结果 一期切除吻合术57例,其中根治性
低密度脂蛋白是动脉粥样硬化的危险因子,而低密度脂蛋白氧化修饰成氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)则增加了它的致动脉粥样硬化性.ox-LDL能诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖,是致动脉
肿瘤—宿主界面微环境主要由肿瘤细胞、宿主细胞、细胞外基质、分泌因子等组成,各成分之间的交互作用形成一个庞大而复杂的网络系统,对肿瘤的发生发展具有重要的调控作用。文
目的:探讨间隙连接蛋白43(Cx43)和E-钙粘素(E-cad)在口腔鳞癌中的表达及其相关性;细胞分化诱导剂全反式维甲酸(ATRA)对人舌鳞癌细胞株(Tca8113)中Cx43和E-cad表达的影响。方
目的:总结无创通气抢救海洛因中毒致急性Ⅱ型呼吸衰竭的治疗经验.方法:15例海洛因中毒致急性Ⅱ型呼吸衰竭患者在常规纳洛酮治疗的同时予以面罩机械通气,并与同期气管插管患者
目的 探讨联合吸入沙美特罗与氟替卡松治疗慢性阻塞性肺疾病(c0PD)在控制症状、改善肺功能、改善健康状况等方面的作用及安全性.方法 450例COPD患者采用完全随机设计方法分为
对谐波检测算法进行了研究,着重研究了自适应LMS算法,利用模糊控制与自适应滤波相结合,提出一种模糊变步长谐波检测算法.利用MATLAB软件对此算法及另一种性能优越的变步长LMS
兰州石化分公司180万t/a催化汽油加氢装置中的反应产物热交换器主体材料为14Cr1MoR+0Cr18Ni10Ti,详细分析了14Cr1MoR+0Cr18Ni10Ti复合钢板的焊接性能,制定了合理的焊接工艺和
随着电网的发展,短路电流超标成为限制电网发展的瓶颈.采用串联谐振型故障电流限制器正常运行时对电网没有影响.而在电网故障时,可以快速启动,将系统短路电流限制到安全数值