胆红素氧化酶及其变异体在胆红素血症评价中的应用

• 作 者: 张雷 张晓 罗智颖
• 机 构: 华南理工大学化工系生物制药研究室,河南省南阳市第一人民医院小儿科,华南理工大学附属医院
• 出 处: 第一军医大学学报
• 发表日期: 2005年11期
• 关键词: 胆红素 胆红素氧化酶 聚合酶链反应 高胆红素血症 bilirubin bilirubin oxidase polymerase chain reaction h
• 基金项目: grant for Guangdong Provincial Laboratory for Green Chemical Technology and by Japan Society for Promotion of Science

目的探讨胆红素氧化酶中配位氨基酸对保持酶活性的重要性和酶促反应的动力学,并评价胆红素氧化酶突变体能否作为一种更好的高胆红素血症的诊断试剂.方法胆红素氧化酶突变体I402G和C457S通过聚合酶链反应获得,并经氨基酸序列测定加以证实.钌搀杂的突变体C457S通过变异体与钌配合物的直接反应得到.研究了重组胆红素氧化酶及其变异体的光谱学性质,以及重组胆红素氧化酶和变异体I402G的酶促反应的动力学.结果变异体I402G和C457S被成功的表达和纯化.变异体I402G表现出较低的活性(1.67 U/mg),C45