羰基还原酶辅酶结合域位点突变对其不对称催化性能的影响

• 作 者: 宫绪敏 聂尧 徐岩 肖荣 Gaetano T.MONTELI
• 机 构: 江南大学生物工程学院,罗格斯大学高级生物技术与医学中心
• 出 处: 催化学报
• 发表日期: 2012年2期
• 关键词: 羰基还原酶 定点突变 催化活性 底物特异性 立体选择性 carbonyl reductase site-directed mutagenesis catalyt
• 基金项目: 国家自然科学基金（30800017）, 国家重点基础研究发展计划（973计划,2011CB710800,2009CB724706）, 国家高技术研究发展计划（863计划,2011AA02A209,2011AA02A210）, 高等学校学科创新引智计划（111计划,111-2-06）, 江苏高校优势学科建设工程资助项目~~

基于同源模型的比较和分析,发现羰基还原酶SCR1辅酶结合域P124和W125位点对辅酶NADPH的结合形成了一定的空间位阻效应.通过对该位点进行小侧基氨基酸的取代突变,该酶的底物专一性和立体选择性均发生了不同程度的改变,表明该位点是酶与辅酶有效结合的关键位点,而且它与辅酶结合的空间效应进一步影响了底物结合域活性中心对不同构型的底物及其对映体产物的亲和作用.在底物专一性方面,野生型酶对2-羟基苯乙酮和2-溴苯乙酮及其衍生物等底物表现出较高的催化活性,而突变株W125A,W125G,P124A/W125A和P