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目的构建携带淋球菌主要外膜蛋白 PIA基因的 pET重组质粒,分析其编码序列.方法根据 PIA已知序列设计一对引物,用 PCR技术从淋球菌捷克标准株中扩增 PIA;将目的基因 PCR产物和质粒 pET28a(+)同时用 BamH Ⅰ和 Hind Ⅲ限制性内切酶进行双酶切,纯化回收后将其连接并将重组质粒转化大肠杆菌 DH5α.将构建的重组质粒 pET28 a(+)-PIA通过 PCR、质粒双酶切、 DNA测序证实获得正确的重组克隆.结果成功构建 PIA基因原核重组质粒 pET28a(+)-PIA.序列分析表