【摘 要】
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目的保留重组质粒pMD18-T-ldh中变形链球菌ldh基因上下游同源区,用运动发酵单胞菌adhB基因置换ldh基因构建重组质粒.方法 PCR法扩增adhB基因,克隆到PGEM-T载体,构建pGEMA重组
【机 构】
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130041,长春,吉林大学口腔医学院儿童牙病科吉林大学农学部畜牧兽医学院生物化学教研室;
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目的保留重组质粒pMD18-T-ldh中变形链球菌ldh基因上下游同源区,用运动发酵单胞菌adhB基因置换ldh基因构建重组质粒.方法 PCR法扩增adhB基因,克隆到PGEM-T载体,构建pGEMA重组质粒,以pMD18-T-ldh重组质粒为模板,反向PCR法缺失ldh,Nco I和Xho I酶产物片段和pGEMA质粒,连接得到重组质粒pMDLA.结果成功克隆adhB基因,并用该基因置换ldh基因构建重组质粒pMDLA.结论本实验成功将反向PCR法引入缺失突变诱导,丰富了运动发酵单胞菌在医学领域的应用.
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