新型I型普鲁兰酶基因的克隆表达及酶学性质

• 作 者: 王青艳 申乃坤 朱婧 秦艳 朱绮霞 谢能中 李亿 黄日波
• 机 构: 广西科学院、国家非粮生物质能源工程技术研究中心、非粮生物质酶解国家重点实验室、广西生物炼制重点实验室
• 出 处: 广西科学院学报
• 发表日期: 2016年2期
• 关键词: Ⅰ型普鲁兰酶 膨胀芽孢杆菌 克隆表达 酶学性质 typeⅠpullulanaseTumebacillus flagellatuscloning and expr
• 基金项目: 国家自然科学基金项目（31160023,31400079）,广西科学研究与技术开发计划项目（桂科合14123001-19,桂科合15104001-1）,广西自然科学基金项目（015GXNSFBA139044）,广西“八桂学者”、南宁市特聘专家和留学人员科技活动项目择优资助项目和广西科学院基本科研业务费项目（15YJ22SW01）资助.

【目的】筛选并克隆表达高酶活且具有-定热稳定性的新型普鲁兰酶.【方法】克隆 Turne bacillus/ Zaelu GST4 的普鲁兰酶基因构建重组质粒后转化宿主菌大肠杆菌进行诱导表达,再运用亲和层析进行纯化并分析其酶学性质和结构.【结果】在大肠杆菌中实现可溶性表达,发酵液上清酶活力达到78 U / m L,粗酶液经纯化后比活力为258 U /mg.重组酶P u l B 最适反应温度和p H 值分别为55曟和5 . 0 ,在较窄的酸性范围内（ 日值4 . 5 -5 . 5 ） 酶活力比较稳定;对普鲁兰