土霉素完全抗原的制备及ELISA检测方法的建立

• 作 者: 曹金博 胡骁飞 王耀 李燕虹 曹夕丹 邢云瑞 孙亚宁 邓瑞广
• 机 构: 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南科技大学食品与生物工程学院,河南农业大学
• 出 处: 食品与机械
• 发表日期: 2019年9期
• 关键词: 土霉素 完全抗原 多抗血清 ELISA Oxytetracyclinecomplete antigenantiserumELISA
• 基金项目: 国家“十二五”科技支撑计划课题(编号:2014BAD13B05),国家重点研发计划(编号:2018YFC1602903),国家自然科学基金(编号:31702218),河南省自然科学基金(编号:182300410038),河南省科技攻关项目(编号:182102110445,182102310230),河南省高等学校重点科研项目(编号:18B550001),河南省动物免疫学重点实验室开放课题(编号:P

为制备土霉素(Oxytetracycline,OTC)完全抗原,获得免疫学特性良好的土霉素鼠源多抗血清并建立OTC免疫学检测方法,采用重氮化法在OTC分子上引入羧基,进而利用改进碳二亚胺法将其与载体蛋白偶联制备完全抗原,通过红外扫描、紫外扫描和凝胶电泳鉴定其偶联效果,然后将完全抗原免疫BLAB/c小鼠获得多抗血清(pAb)并对其免疫学特性进行鉴定,通过优化条件建立OTC间接竞争ELISA检测方法。结果表明,偶联效果良好,免疫的4只小鼠多抗血清效价均达到1 12 800;4只小鼠多抗血清均有抑制效果,其中2