拟南芥AtGrp7RRM结构域的纯化及其结构与结合的初步分析(英文)

• 作 者: 迟秀娟 乔晓亚 刘颖 刘惠丽 陈雷 王际辉 艾选军
• 机 构: 大连工业大学生物工程学院,洁净能源国家实验室（中国科学院大连化学物理研究所）,国家艾滋病性病防治中心,波谱与原子分子物理国家重点实验室、武汉磁共振中心（中国科学院武汉物理与数学研究所）
• 出 处: 波谱学杂志
• 发表日期: 2019年1期
• 关键词: 变性-复性 快速稀释 核磁共振(NMR) AtGrp7 RNA识别基序(RRM)结构域 结合分析 denaturing-refoldingquick-dilut
• 基金项目: The Liaoning Natural Science Foundation(20170520198,20170520043),Project Supported by the State Key Laboratory of Magnetic Resonance and Atomic and Molecular Physics(T151601).

富含甘氨酸的RNA结合蛋白AtGrp7是拟南芥(Arabidopsis thaliana)调节生物钟负反馈回路的组分.在使用常规方法纯化AtGrp7 RRM结构域的初始试验中,观察到烟草蚀纹病毒(TEV)酶切后AtGrp7 RNA识别基序(RRM)结构域的紫外吸收峰为蛋白和杂质的混合信号峰.为解决常规纯化中的杂质问题,对AtGrp71-90应用了变性-复性两步纯化方法.AtGrp7 RRM结构域的1H-15N HSQC指纹谱和CS-Rosetta模型结构表明快速稀释重折叠后其结构完全恢复.等温滴定量热法(