带有6肽组氨酸的HBV S／S145真核表达载体的构建及应用

• 作 者: 覃莉 田拥军 张正茂 郝友华 王宝菊 杨东亮
• 机 构: 华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室
• 出 处: 华中医学杂志
• 发表日期: 2008年2期
• 关键词: 乙型肝炎病毒 变异 抗原表位标记 Hepatitis B virus Mutant Epitope tagging

目的构建稳定表达带有6肽组氨酸的HBVS／S145蛋白的真核载体。方法应用PCR技术及体外基因重组技术，将S基因和nt587突变的s基因插入带有his—tag的pxF2RH载体中，扩增6个组氨酸和S／S145基因，最后与经Nhe Ⅰ、Sal Ⅰ双酶切的线性载体pCI—neo连接，构建成带有6肽组氨酸的稳定表达S／S145的真核表达载体（简称pCI—his-SY／S145）。用脂质体转染的方法将质粒转至入宫颈癌细胞，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清中抗原的分泌情况。用western-blot方