【摘 要】
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目的: 探讨ΔNIκBα基因对NF -κB活性的调节作用。方法: 构建去除Ser32和Ser36磷酸化位点的IκBα重组腺病毒Ad- ΔNIκBα。A549细胞分为 3组: 即LPS组、Ad- LacZ+LPS组和
【机 构】
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南京医科大学生物化学与分子生物学系; 南京医科大学生物化学与分子生物学系 江苏南京210029; 江苏南京210029; 江苏南京210029;
【基金项目】
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南京医科大学创新基金资助项目(No. 2003 1913)
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目的: 探讨ΔNIκBα基因对NF -κB活性的调节作用。方法: 构建去除Ser32和Ser36磷酸化位点的IκBα重组腺病毒Ad- ΔNIκBα。A549细胞分为 3组: 即LPS组、Ad- LacZ+LPS组和Ad -ΔNIκBα+LPS组。LPS组单纯用内毒素(LPS)激活NF -κB; Ad -LacZ+LPS组及Ad ΔNIκBα+LPS组在用LPS前 2d, 分别感染Ad -LacZ和Ad- ΔNIκBα。用West ernblot、电泳迁移率变动分析 (EMSA)和ELISA法分别检测LPS刺激后 5h, 细胞总蛋白中NF κB的活性和培养上清中TNF -α及IL- 6的含量。结果: Ad -ΔNIκBα+LPS组NF -κB的活性, TNF- α和IL -6的含量, 均显著低于LPS组及Ad- LacZ+LPS组。结论: 突变后的IκBα可明显抑制NF- κB活化, 减少TNF- α和IL- 6的释放, 有望成为一种强有力的抗炎治疗制剂。
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