【摘 要】
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目的:探讨胰腺癌细胞系中长链非编码RNA CRNDE(LncRNA CRNDE)的表达及对细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法:通过real-time RT-PCR检测LncRNA CRNDE在胰腺癌细胞系和正常胰腺导管上皮细胞系中的表达.将胰腺癌细胞系Panc-1分成3组,LncRNA CRNDE沉默表达组(si-CRNDE组)﹑阴性对照组(si-NC组)及空白对照组(Blank组),对si-CRNDE组及si-NC组采用LipofectamineTM 3000分别转染LncRNA CRNDE沉默序列(si
【机 构】
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海南省人民医院,海南医学院附属海南医院肝胆胰外科,海口 570000
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目的:探讨胰腺癌细胞系中长链非编码RNA CRNDE(LncRNA CRNDE)的表达及对细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法:通过real-time RT-PCR检测LncRNA CRNDE在胰腺癌细胞系和正常胰腺导管上皮细胞系中的表达.将胰腺癌细胞系Panc-1分成3组,LncRNA CRNDE沉默表达组(si-CRNDE组)﹑阴性对照组(si-NC组)及空白对照组(Blank组),对si-CRNDE组及si-NC组采用LipofectamineTM 3000分别转染LncRNA CRNDE沉默序列(si-CRNDE)及阴性对照序列(si-NC),Blank组仅给予缓冲盐溶液对照.采用real-time RT-PCR验证沉默效率,CCK-8实验测定细胞增殖能力,细胞划痕实验测定细胞迁移能力,Transwell实验测定细胞侵袭能力,蛋白质印迹实验测定c-Myc和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白的表达.结果:胰腺癌细胞系Panc-1(P<0.01)、AsPC-1(P<0.01)、HPAC(P<0.05)、BxPC-3(P<0.05)中LncRNA CRNDE相对表达量高于HPDE6-C7细胞系.转染siRNA 48 h后,si-CRNDE组LncRNA CRNDE相对表达量低于si-NC组(P0.05),在72和96 h,二者差异有统计学意义(分别P<0.05和P0.05).细胞划痕实验结果示si-CRNDE组细胞划痕愈合率低于si-NC组[(26.3±2.8)％vs(52.1±3.7)％,P<0.05].Transwell实验示si-CRNDE组侵袭细胞数少于si-NC组(108±15 vs 319±21,P<0.05).蛋白质印迹结果示si-CRNDE组c-Myc蛋白质表达量低于si-NC组(0.47±0.04 vs 1.02±0.03,P<0.05).si-CRNDE组p-ERK蛋白质表达量低于si-NC组(0.27±0.04 vs 1.04±0.05,P<0.01).结论:LncRNA CRNDE在胰腺癌细胞系中高表达,沉默LncRNA CRNDE表达可抑制胰腺癌细胞的增殖﹑迁移和侵袭,机制可能与c-Myc﹑p-ERK蛋白下调表达有关.
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