蓝舌病病毒血清8型NS3蛋白在昆虫杆状病毒系统中的表达与鉴定

• 作 者: 黄超华 曹琛福 阮周曦 史卫军 林彦星 曾少灵 刘建利 王潇
• 机 构: 华南农业大学兽医学院,深圳海关动植物检验检疫技术中心
• 出 处: 中国兽医杂志
• 发表日期: 2020年4期
• 关键词: 蓝舌病病毒 昆虫杆状病毒 NS3蛋白 间接ELISA bluetongue virusbaculovirusNS3indirect-ELISA
• 基金项目: “十三五”国家重点研发计划项目(2017YFD0-502304,2017YFD0501805)

为表达蓝舌病病毒NS3蛋白,将蓝舌病病毒血清8型NS 3序列克隆至pFastBac-HTA载体上,经转座、转染后获得重组杆状病毒rBac-NS3;用间接免疫荧光(IFA)检测NS3蛋白的表达情况,并采用亲和层析进行纯化;以Western Blot和间接ELISA方法鉴定NS3蛋白的反应原性。IFA结果显示,重组杆状病毒rBac-NS3感染的Sf9细胞可以大量表达NS3蛋白。Western Blot结果显示,纯化后的NS3蛋白与抗His单抗和绵羊蓝舌病阳性血清能够发生特异性反应;以纯化的NS3蛋白为包被抗原