N-钙黏素融合蛋白对P19细胞神经分化的影响

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目的 探讨细胞问黏附分子对胚胎癌P19细胞体外定向神经细胞分化的作用.方法 通过单层培养技术,采用视黄酸为诱导剂诱导P19细胞神经细胞分化,在浓度分别为0.1%明胶、2.5 mg/L和10 mg/L的N-钙黏素融合蛋白(N-cad-Fc)包被的培养板上进行培养,观察细胞形态的变化情况,用神经细胞特异标志蛋白β-Ⅲ型微管蛋白(Tuj-1)抗体进行免疫荧光染色,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测干细胞标志蛋白(oct3/4)、神经前体细胞标志蛋白巢蛋白(nestin)、神经元素1(ngn1)、微管相关蛋白(map2)和神经胶质细胞的特异性标志蛋白(gfap)的表达情况.结果 使用5×10-7mol/L的视黄酸成功诱导了P19细胞神经细胞分化,0.1%明胶组、2.5 mg/L N-cad-Fc组和10 mg/L N-cad-Fc组分化为神经元细胞的百分率分别为7.8%、28.6%和26.8%,在包被有N-cad-Fc的培养板上培养,神经标志性蛋白ngn1和map2的表达明显提前、增强,干细胞标志蛋白oct3/4表达提前减弱,未见神经胶质细胞的特异性标志蛋白gfap表达.结论 视黄酸可以诱导P19细胞向神经细胞分化,细胞间黏附分子对分化有促进作用。

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