靶向mdr1基因shRNA真核表达载体的构建及鉴定

• 作 者: 干惠珠 张桂珍 张凤春 卜丽莎 杨绍娟 高申 郑德明
• 机 构: 吉林大学中日联谊医院血液肿瘤科,吉林大学中日联谊医院中心研究室,上海交通大学医学部附属仁济医院肿瘤科
• 出 处: 蚌埠医学院学报
• 发表日期: 2007年4期
• 关键词: MDR1基因 RNA干扰 SHRNA表达载体 mdr1 gene RNA interference shRNA expression vector

目的：设计并构建靶向mdr1基因shRNA真核表达质粒.方法：以mdr1为靶基因设计具有短发夹结构的模板寡核苷酸，退火形成互补双链结构，再克隆至pSilencerTM3.1-H1neo载体，构建重组的短发夹shRNA表达载体.采用酶切法和测序法鉴定.结果：经限制性内切酶酶切电泳后显示有66bp模板寡核苷酸片段和4.3kbp的线性化的pSilencerTM3.1-H1neo载体片段.重组子测序结果与Genebank中的mdr1基因cDNA序列相符.结论：重组靶向mdr1基因shRNA表达载体构建正确，为进一