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目的:对细胞外调节蛋白激酶(ERK)8进行表达、纯化及活性鉴定。方法:PCR扩增目的基因ERK8,进行Bam HⅠ和HindⅢ双酶切,与经Bam HⅠ和HindⅢ表达载体p ET-28a进行连接,转化大肠杆菌BL21,以不同浓度(0.2、0.4、0.8、1.0mmol/L)异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)和不同温度(15、20、25、37℃)对重组质粒进行诱导表达,并用Western blot技术鉴定表达的融合蛋白;用Ni2+金属螯合亲和层析柱法对融合蛋白进行纯化。结果:成功构建p ET-28a-