【摘 要】
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目的 为了获得较高的地中海拟无枝酸菌的转化率,进行了电转化条件的优化。方法 以大肠埃希菌.拟无枝酸菌穿梭质粒pULVKl-Am为载体,地中海拟无枝酸菌为受体菌,考察了收集菌体时
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目的 为了获得较高的地中海拟无枝酸菌的转化率,进行了电转化条件的优化。方法 以大肠埃希菌.拟无枝酸菌穿梭质粒pULVKl-Am为载体,地中海拟无枝酸菌为受体菌,考察了收集菌体时期、细胞壁弱化方式、电击缓冲液和电击参数等因素对转化率的影响。结果 以0.1gg/mL氨苄西林处理细胞,A600为0.7~0.8时收集菌体,用溶菌酶.LiAc-DTT溶液于37℃孵育30min,去离子水作电击缓冲液,7.5kV/cm、25gF、750W下进行电击,转化率最高可达到9.23×104CFU/μg质粒DNA
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