【摘 要】
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目的构建GST-hPlk2融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌（E.coli）中诱导表达。方法从人HEK293细胞中提取mRNA,反转录为cDNA。用PCR方法扩增出hPlk2基因全长,通过BamHⅠ和Xh
【机 构】
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中国医科大学附属盛京医院,中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室,明尼苏达大学实验病理系
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目的构建GST-hPlk2融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌（E.coli）中诱导表达。方法从人HEK293细胞中提取mRNA,反转录为cDNA。用PCR方法扩增出hPlk2基因全长,通过BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点将其定向插入pGEX-4T-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-hPlk2,并转化E.coli DH5α,筛选阳性重组子,通过限制性内切酶酶切电泳鉴定和DNA序列测定正确后,转入E.coli BL21中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷大量诱导表达,SDS-PAGE电泳和Wester
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