【摘 要】
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目的 研究Mel 18基因在急性白血病细胞株U937的表达情况及其对U937细胞生长的影响.方法 RT_PCR方法检测Mel 18在U937细胞中的表达.用亚克隆技术构建真核表达质粒pLenti6/V5-M
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞中心
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目的 研究Mel 18基因在急性白血病细胞株U937的表达情况及其对U937细胞生长的影响.方法 RT_PCR方法检测Mel 18在U937细胞中的表达.用亚克隆技术构建真核表达质粒pLenti6/V5-Mel 18,脂质体转染法将重组质粒pLenti6/V5一Mel 18和对照质粒pLenti6/V5一LacZ分别导入U937细胞,以RT-PCR法和流式细胞仪检测U937细胞转染后Mel 18的表达情况,CCK-8法检测细胞增殖活性.结果 U937细胞中未检测到Mel 18的表达.成功构建了Mel 18的正义真核表达质粒pLenti6/V5-Mel 18,并将其成功导入U937细胞.pLenti6/V5一Mel 18质粒转染U937细胞24 h后,流式检测Mel 18蛋白的阳性表达率为(23.75±2.32)%.相对于亲代细胞,转染pLenti6/V5-Mel 18组与转染pLenti6/V5一LacZ组的24 h增殖活性分别为(70.86±1.08)%和(95.89±1.26)%,48 h增殖活性为(46.93±1.12)%和(95.43±1.63)%,差异均有极显著性意义(P
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