黄芪甲苷对人脐血间充质干细胞增殖与成管分化的影响

• 作 者: 宾马赢 徐晴文 白雪 肖慧 李卓燕 朱芙蓉 聂昆 熊武
• 机 构: 湖南中医药大学第一附属医院烧伤整形外科，长沙 410007,湖南中医药大学中西医结合学院，长沙 410208,湖南中医药大学第一附属医院内分泌科，长沙 410007,湖南中医药大学第一附属医院内分泌科
• 出 处: 中国医师杂志
• 发表日期: 2021年23期
• 关键词: 黄芪甲苷 间充质干细胞 细胞增殖 成管分化 血管新生

目的

探讨黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对人脐血间充质干细胞(hUCBMSCs)体外增殖和成管分化的影响，为进一步研究AS-Ⅳ作用于间充质干细胞介导的血管新生奠定基础。

方法

从足月健康新生儿脐带血中提取并传代培养得到hUCBMSCs，分别进行成骨、成软骨和成脂诱导分化鉴定，同时对hUCBMSCs表面抗原CD44，CD73，CD105进行流式细胞仪鉴定。将鉴定成功的hUCBMSCs分别在不同浓度梯度的AS-Ⅳ(0、50、100、200、300、400 mg/L)干预下培养，确定AS-Ⅳ促hUCBMSCs增殖的最佳浓度。另将hUCBMSCs随机分为实验组和对照组，实验组用最佳浓度的AS-Ⅳ干预，对照组用等体积的PBS液处理。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测AS-Ⅳ对hUCBMSCs增殖的影响，另通过Matrigel体外成管实验检测AS-Ⅳ对hUCBMSCs成管分化的影响，并用免疫荧光检测hUCBMSCs向内皮细胞分化后CD31、血管性血友病因子(vWF)的表达情况。

结果

光镜下hUCBMSCs细胞边缘清晰，排列整齐，呈典型的长梭状结构。流式细胞仪证实hUCBMSCs细胞表面有间充质干细胞的表面标志物。AS-Ⅳ促进hUCBMSCs增殖的最佳浓度为300 mg/L。对照组和实验组的OD值分别为(0.51±0.01)和(0.98±0.05)，差异具有统计学意义(t＝15.96，P<0.05)，显示实验组增殖能力增强。Matrigel成管实验显示，与对照组比较，实验组体外成管密度更大，体外形成管网状结构的长度更长，差异具有统计学意义[(629.80±52.94)mm vs (110.36±13.19)mm，P<0.05]。与对照组相比，实验组AS-Ⅳ诱导hUCBMSCs成管分化后CD31和vWF的表达均增多，差异有统计学意义(t＝13.64，13.18，P<0.05)。

结论

AS-Ⅳ对人脐血间充质干细胞无毒性，且能改善其增殖功能，并诱导hUCBMSCs向内皮细胞成管分化。