【摘 要】
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研制了基于抗体包被化学镀纳米金(AuNPs)和[Cu(bpy)_2(ONO)]NO_3配合物(CuL)共固定修饰玻碳电极(GCE)的安培免疫传感器,并用于血清中癌胚抗原(CEA)的检测.首先将GCE电极表面
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研制了基于抗体包被化学镀纳米金(AuNPs)和[Cu(bpy)_2(ONO)]NO_3配合物(CuL)共固定修饰玻碳电极(GCE)的安培免疫传感器,并用于血清中癌胚抗原(CEA)的检测.首先将GCE电极表面氧化形成羧基,进而键合上乙二胺.将此胺化电极浸泡在CuL和化学镀金溶液后,CuL可通过π-π堆积作用吸附到GCE表面,并在电极表面还原成30～50nm 的纳米金层(GCE∣CuL/AuNPs).将上述电极浸泡在CEA抗体(anti CEA)溶液中,利用AuNPs周定anti CEA,并通过辣根过氧化物酶(HRP)封闭剩余的AuNPs位点,由此构建了一类快速检测CEA的无试剂安培免疫传感器(GCE∣CuL-AuNPs/anti CEA-HRP).其中CuL作为电子媒介体对过氧化脲(CP)有催化还原作用,而且HRP可增强这种作用.当该传感器在37 ℃下,含CEA的pH 6.5 PBS溶液中温育30 min后,随着温育液中CEA浓度的增加,电极表面形成的免疫复合物也增加,导致CuL对CP的催化电流下降.电流下降百分比1%与CEA浓度在0.1～80 ng/mL之间成线性关系,检测限为0.052 ng/mL(3σ).由于采用化学镀法可以方便地在GCE表面制备纳米金膜进而包被抗体,并通过π-π堆积作用吸附CuL作为电子媒介体,故该免疫电极制备简单;采用可催化CP还原的HRP封闭AuNPs层多余位点,大大提高了电极灵敏度,有望用血清中痕量CEA分析.
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