非同位素标记探针检测登革病毒RNA的研究

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lcb225
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用地高辛配基(Digoxigenin,Dig)、生物素(Biotin,Bio)和辣根过氧化物酶(Horseradish peroxidase,HRP)分别标记登革病毒2型(Dengue virus type 2,DV2)的cDNA,制备三种非同位素标记探针,与感染DV2的C6/36细胞上清中病毒核酸做斑点杂交。结果表明:三种标记探针均只与DV2-RNA呈强阳性杂交反应,显示DV2型特异性;Dig-探针最灵敏,可检出DV2-RNA的最小量为0.1pg,其次为HRP-探针(可检出0.3pg)和Bio-探针(可检出1~3pg)。用PCR技术制备探针并同步标记比其他方法简便、快速,只需少量模板数小时内可获得足够量的标记探针,是值得推广使用的标记探针制备方法。

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