【摘 要】
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本研究旨在建立一种可辅助猪流行性腹泻病毒(PEDV)分离鉴定的直接荧光抗体检测方法。借助基因工程技术融合表达PEDV S 1基因中和抗原表位区域(COE),层析柱法纯化兔源免疫球蛋
【机 构】
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山东省滨州畜牧兽医研究院,滨州市农村科技信息化管理中心,山东绿都生物科技有限公司,清华大学生命科学学院
【基金项目】
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山东省自然科学基金项目(ZR2016CM35)
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本研究旨在建立一种可辅助猪流行性腹泻病毒(PEDV)分离鉴定的直接荧光抗体检测方法。借助基因工程技术融合表达PEDV S 1基因中和抗原表位区域(COE),层析柱法纯化兔源免疫球蛋白IgG,搅拌法标记荧光素。通过Western blotting和动物免疫试验测定表达融合蛋白的抗原性,间接ELISA方法测定免疫后的抗体效价,直接免疫荧光法测定标记荧光抗体的特异性,梯度稀释方法测定标记抗体的最佳工作浓度。结果显示,本研究成功将423 bp的S 1基因中和抗原表位COE进行融合表达,表达蛋白大小约40 ku,蛋
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