【摘 要】
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目的:研究猪苓多糖(PPS)对膀胱癌细胞(T739)TLR2/4-NF-κB通路相关基因表达的影响及其与TLR2/4关系。方法:应用qRT-PCR、Western blot和流式细胞术(FCM)等方法检测PPS作用T73
【机 构】
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广州中医药大学第二附属医院中心实验室,
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目的:研究猪苓多糖(PPS)对膀胱癌细胞(T739)TLR2/4-NF-κB通路相关基因表达的影响及其与TLR2/4关系。方法:应用qRT-PCR、Western blot和流式细胞术(FCM)等方法检测PPS作用T739细胞后IKKβ、NF-κBp65、ICAM1和CCL2mRNA与蛋白表达变化;应用标记探针结合酶联免疫吸附法检测PPS作用T739细胞后NF-κBp65DNA结合活性改变;应用免疫组化方法观察PPS作用T739细胞后NF-κBp65胞核表达变化。结果:PPS作用T739细胞后,IKBKB(IKKβ)、RelA(NF-κBp65)、ICAM1和CCL2mRNA表达均显著下降,IKKβ、CCL2蛋白表达也下调,ICAM1蛋白表达无明显变化,并且沉默TLR4后能抑制上述基因表达下调,沉默TLR2作用不明显。同时PPS能减弱T739细胞胞核的NF-κBp65DNA结合活性及下调NF-κBp65胞核表达;沉默TLR4后能抑制NF-κBp65的DNA结合活性的降低与NF-κBp65胞核表达的下调。结论:猪苓多糖主要经TLR4信号通路抑制相关基因表达、NF-κBp65DNA结合活性与胞核表达,TLR2信号通路也参与了2个基因表达的介导作用。
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