【摘 要】
：
目的敲除大肠埃希菌JM109表面抗原43(Ag43)基因并对其进行鉴定。方法采用Sigma公司的TargeTron基因敲除系统和Ag43基因特异设计的PCR引物扩增获得突变Ⅱ组内含子RNA蛋白复合
论文部分内容阅读
目的敲除大肠埃希菌JM109表面抗原43(Ag43)基因并对其进行鉴定。方法采用Sigma公司的TargeTron基因敲除系统和Ag43基因特异设计的PCR引物扩增获得突变Ⅱ组内含子RNA蛋白复合体(RNP)基因序列,然后将这段基因序插入表达RNP的质粒pACD4K-C中,获得Ag43特异的重组RNP质粒pACD4K-Ag43。最后将pACD4K-Ag43转化JM109,经过IPTG诱导表达将Ⅱ组内含子插入Ag43特异的部位。结果通过软件分析发现插入Ⅱ组内含子的最佳位点位于碱基1 812和1 913之间,琼脂糖凝胶电泳发现PCR扩增的突变Ⅱ组内含子RNP基因序列分子量大小和预期值(350bp)相一致,用NheⅠ和HindⅢ二种酶切分析重组质粒pACD4K-Ag43结果和预期值相符,PCR扩增相应产物和基因测序显示Ⅱ组内含子特异地插入Ag43基因碱基序列的1 812/1 913位点。结论成功地将大肠埃希菌JM109中的基因敲除,为更进一步深入研究Ag43基因的功能和将其作为制备重组Ag43嵌合蛋白的宿主菌奠定了基础。
其他文献
基于语言变异理论，从语言功能的角度出发，在中国英语变体功能的分析模式的基础上，着重探究中国英语变体在语言、文化、社会语境中的标记功能，揭示了中国英语变体不仅仅是语言形式
研究哲学问题必须确定一个中心问题以明确基本观念与看法,这就是对哲学基本问题研究的必要性所在。恩格斯在《路德维希·费尔巴哈与德国古典哲学的终结》一书中阐述了他对思
住房建设是社会主义新农村建设的一个重要组成部分，与农民的生产和生活息息相关，通过深入研究，对新农村住房建设中存在的一些问题进行探讨，希冀新农村建设在推动工业化、城镇化、
经支气管镜介入治疗已逐渐成为治疗中央气道病变的新手段。为使该项技术在我国规范化开展,呼吸科医生必须严格掌握其治疗适应证,明确治疗目的并正确选择治疗方法。本文还介绍
<正>"十三五"是全面建成小康社会与打赢脱贫攻坚战的决胜阶段,各地各部门正实施精准扶贫基本方略,为打赢脱贫战创新工作模式,攻坚克难。金融扶贫是整个扶贫工作链条上不可缺
[目的]探讨胃癌组织及其相应癌旁组织中Notch1及其配体Jagged1、下游信号Hes1的表达情况,并分析其临床意义。[方法 ]采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测胃癌组织及其相应的癌
服装行业的兴衰是关系我国经济发展的一个重要问题。服装业的发展，需要具备有竞争力的高素质人才。服装设计人才的培养应该充分结合该专业学生的心理特点，不断优化教学模式，加强
<正>用基本款结合差异化菜品的方式招揽大批顾客,用细节服务提升顾客就餐体验,用大数据合理配置资源,这种"全链条"营销让绿茶餐厅迅速"火"了起来发源于杭州,主打"创意菜",前
"适老化"景观空间可以为老年人提供一个良好的活动与休憩场所。针对老年人感官系统特点,从视觉、触觉、听觉、嗅觉出发,介绍了其外部环境景观设计时的一些细节处理方式,最大