【摘 要】
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目的探讨微小RNA-7(miRNA-7)对人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞增生和迁移的调控作用。方法利用脂质体Lipofectamine 2000将miRNA-7前体miRNA-
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目的探讨微小RNA-7(miRNA-7)对人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞增生和迁移的调控作用。方法利用脂质体Lipofectamine 2000将miRNA-7前体miRNA-145(miRNA-7前体干预组)和阴性对照物(阴性miRNA对照组)转染hRPE细胞,同时设立空脂质体组和空白对照组,采用Real-Time PCR检测成熟miRNA-7的表达,CCK-8检测细胞增殖抑制情况,用直径为8.5 mm的Boyden小室进行细胞迁移能力的检测,对4组结果作统计学分析。结果 miRNA-7对hRPE细胞增殖有明显抑制作用,miRNA-7前体干预组细胞增殖抑制率(23.58%)明显高于阴性miRNA对照组(2.35%)、空脂质体组(2.97%)与空白对照组(0%),差异均具有统计学意义(均为P<0.05),空脂质体组、阴性miRNA对照组与空白对照组之间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。在miRNA-7前体干预组中,迁移细胞数明显较少,每高倍视野为(16.0±3.8)个,而在阴性miRNA对照组、空脂质体组和空白对照组中,迁移细胞数明显较多,每高倍视野分别为(32.2±7.8)个、(31.4±6.9)个和(33.9±8.4)个,miRNA-7前体干预组细胞迁移数较后3组显著减少,差异均有统计学意义(均为P<0.01),而后3组之间差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 miRNA-7可明显抑制hRPE细胞的增殖和迁移,这种抑制作用可能是由于miRNA-7对hRPE细胞的EGFR通路产生了良好的靶向沉默后效应,直接下调EGFR表达,从而阻断或部分阻断了ERK1/2信号通路,使得hRPE细胞的增殖和迁移受到明显抑制。
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