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[目的]对北方黄酒麦曲中真菌的5.8S rDNA-ITS序列进行PCR扩增、测序以鉴定其中的真菌.[方法]利用梯度稀释法和划线纯化法共分离纯化得到5株霉菌和1株酵母,并对分离得到的真菌进行基因组DNA提取获得模板,用特异性引物进行PCR扩增,得到真菌的5.8SrDNA-ITS片段,片段测序后进行Blast比对鉴定,构建系统发育树.[结果]将5株霉菌鉴定为多枝横梗霉(Lichtheimia ramo-sa),米曲霉(Aspergillus oryzae),产紫青霉(Penicillium purpurogenum),杂色曲霉(Aspergillus versicolor),交链孢霉(Alternariamali),将一株酵母鉴定为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae).[结论]利用分子生物学的方法对北方黄酒麦曲样品中的真菌进行了分离、纯化和鉴定.