【摘 要】
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目的 克隆人α1 抗胰蛋白酶 (α1 -AT)基因并在真核细胞中表达。方法 以人α1 抗胰蛋白酶(α1 -AT)基因的总RNA为模板,采用反转录PCR法得到α1 -AT的编码区cDNA,构建真核表
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目的 克隆人α1 抗胰蛋白酶 (α1 -AT)基因并在真核细胞中表达。方法 以人α1 抗胰蛋白酶(α1 -AT)基因的总RNA为模板,采用反转录PCR法得到α1 -AT的编码区cDNA,构建真核表达载体pcD NA3. 1( +) -α1 -AT,在脂质体介导下转染非洲绿猴肾细胞系COS-7,经G418压力筛选建立稳定转染人α1 -AT的细胞系,用Western印迹检测其在COS-7细胞中的表达。结果 获得的人α1 -ATcDNA序列与文献报道的核苷酸序列一致,Western印迹证实稳定转染人α1 -AT的COS-7细胞系中有α1 -AT的表达。结论 构建了人α1 抗胰蛋白酶的真核表达载体,并在COS-7细胞中获得稳定表达。
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