【摘 要】
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目的 建立大鼠血浆中低聚仿刺参糖胺聚糖(DAHG-1W)的液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)测定万法,研究大鼠单次静脉注射DAHG-1W后的血浆药物动力学.方法 大鼠血浆样品经灰色链霉菌
【机 构】
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中国海洋大学海洋药物教育部重点实验室,山东省糖科学与糖工程重点实验室,医药学院,山东青岛266003;青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋药物与生物制品功能实验室,山东青岛266237
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目的 建立大鼠血浆中低聚仿刺参糖胺聚糖(DAHG-1W)的液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)测定万法,研究大鼠单次静脉注射DAHG-1W后的血浆药物动力学.方法 大鼠血浆样品经灰色链霉菌蛋白酶预处理、温和酸水解脱除岩藻糖支链、硫酸软骨素ABC 酶降解成主链二糖并用2-氨基吖啶酮(AMAC)衍生后,进行LC-MS/MS 分析.色谱分离采用Cortecs UPLC T3 色谱柱(2.1 mm x 150 mm,1.6 μm),流动相为10 mmol·L-1 乙酸铵水溶液-甲醇,梯度洗脱.质谱检测采用加热电喷雾离子源(H-ESI),以负离子方式检测,AMAC标记的CS-4S6S 和CS-2S4S(内标)的多反应监测(MRM)离子对均为m/z 732.0→652.4,保留时间分别为9.0 和7.4 min.应用上述LC-MS/MS 方法测定大鼠尾静脉注射DAHG-1W(5 mg·kg-1)后的血浆药物浓度,采用WinNonLin 6.0版软件计算药代动力学参数.结果 大鼠血浆中DAHG-1W在3.91～125.00 μg·mL-1 浓度范围内线性关系良好;日内和日间精密度均小于15％,准确度为102.60％～111.17％;回收率为89.16％～103.35％;无明显基质效应且血浆样品稳定性好.大鼠静脉注射给药后DAHG-1W的血药峰浓度(Cmax)为(36.73±2.10)μg·mL-1,半衰期(t1/2)为(277.31±56.22)min,清除率(Cl)为(0.82±0.09)mL·min-1·kg-1,0～300 min 药时曲线下面积(AUC0-t)为(3638.30±45.84)min·μg·mL-1.结论 本研究建立了大鼠血浆中DAHG-1W 的LC-MS/MS 分析方法,可应用于DAHG-1W在大鼠体内的药物动力学研究.
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