【摘 要】
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目的 构建类固醇激素和异质素受体（SXR）基因Nrli2过表达质粒，并通过HEK-293细胞系验证其表达。方法大鼠肝组织中的总RNA逆转录后将含相应酶切位点的引物扩增到Nrli2编码框，并将Nrli2片段亚克隆至pcDNA3．1（＋），同时对其进行酶切和测序鉴定，挑选pcDNA3．1（＋）．Nrli2转染至293细胞系中，48h收集细胞进行荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR），72h后Wester
【机 构】
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广东医学院附属医院肝胆外科,广东湛江524001,广东医学院附属医院肝胆外科,广东湛江524001,广东医学院附属医院肝胆外科,广东湛江524001,广东医学院附属医院肝胆外科,广东湛江524001
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目的 构建类固醇激素和异质素受体（SXR）基因Nrli2过表达质粒，并通过HEK-293细胞系验证其表达。方法大鼠肝组织中的总RNA逆转录后将含相应酶切位点的引物扩增到Nrli2编码框，并将Nrli2片段亚克隆至pcDNA3．1（＋），同时对其进行酶切和测序鉴定，挑选pcDNA3．1（＋）．Nrli2转染至293细胞系中，48h收集细胞进行荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR），72h后Westernblot法检测。结果成功扩增Nrli2编码区，并将其克隆至载体pcDNA3．1中。HEK-293细胞系、pcDNA-3．1（＋）、pcDNA3．1（＋）-Nrli2中SXR的FQ—PCR结果分别为1．00±0．09、4．88±0．94、473274．04±28784．24，后者分别与前两者比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论成功构建Nrli2过表达载体，并在HEK-293细胞中成功表达。
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