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目的 探讨兔气管支架最佳脱细胞周期,进行生物力学性能及细胞外基质结构完整性评价.方法 选取40只健康新西兰兔,体质量2.5～3.0 kg,雌雄不限.随机数字表法分为8组(n=5),A组为新鲜对照组,B、C、D、E、F、G、H组对应脱细胞1、3、5、6、7、8、9周期组.取同种气管,通过去污剂-联合酶法(DEM)分别行气管周期脱细胞处理,通过HE、Movat五色、DAPI染色显微镜观察、扫描电镜观察及生物力学性能测定,判断最佳脱细胞周期并行相关性能评价.结果 与对照组相比,经7个DEM循环之后组织工程基质细胞核溶解、极少数细胞残留,结构体系未见明显破坏；组织学与分子生物学分析证实细胞成分及细胞核物质近乎全部去除；扫描电子显微镜(SEM)显示脱细胞基质依然保持完整的结构体系；生物力学证实脱细胞并未对基质形态学及机械性能产生明显影响；免疫荧光分析显示脱细胞气管基质细胞核物质显著减少(P＜0.05).结论 通过7周期改良DEM处理,能够有效获取长段无免疫原性脱细胞兔组织工程气管,具有与原生气管相似的结构体系及生物力学性能,是一种较为理想的支架材料。