【摘 要】
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目的 探讨中介素(intermedin,IMD)对脂多糖(lipopo-lysaccharide,LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞系RAW 264.7极化的影响及其作用机制.方法 RAW 264.7细胞随机分为对照组、LPS组、LPS+IMD组、LPS+IMD+CC(AMPK抑制剂Compound C)组.Real time-PCR法检测TNF-α、CD86、iN-OS、Arg-1、CD206 mRNA表达,Western blot法检测p-AMPK、AMPK、TNF-α、IL-6和IL-10蛋白表达,流式细
【机 构】
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山西医科大学微生物学与免疫学教研室,山西 晋中 030600;山西白求恩医院检验科,山西医学科学院,同济山西医院,山西医科大学第三医院,山西 太原 030032;华中科技大学同济医学院附属同济医院,湖
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目的 探讨中介素(intermedin,IMD)对脂多糖(lipopo-lysaccharide,LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞系RAW 264.7极化的影响及其作用机制.方法 RAW 264.7细胞随机分为对照组、LPS组、LPS+IMD组、LPS+IMD+CC(AMPK抑制剂Compound C)组.Real time-PCR法检测TNF-α、CD86、iN-OS、Arg-1、CD206 mRNA表达,Western blot法检测p-AMPK、AMPK、TNF-α、IL-6和IL-10蛋白表达,流式细胞术检测巨噬细胞亚型,ELISA法检测培养基上清IL-6和TNF-α浓度.结果 与对照组及LPS组比较,IMD处理可增加AMPK磷酸化水平,增加p-AMPK/AMPK比值;与对照组相比,LPS诱导可导致巨噬细胞发生M1极化,M1型标志分子CD86、TNF-α及iNOS mRNA表达升高,M2型标志分子CD206、Arg-1 mRNA表达降低,上调促炎因子TNF-α、IL-6表达,降低抑炎因子IL-10表达,使M1型细胞数量增加,细胞上清中TNF-α、IL-6分泌增加;而IMD处理可抑制LPS诱导的M1极化,AMPK抑制剂Compound C组处理可在一定程度上拮抗这一作用.结论 IMD通过激活AMPK信号通路抑制LPS诱导的巨噬细胞M1型极化.
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