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[目的]探索制备不同分子量驴骨肽的工艺,并通过细胞试验对其抗骨质疏松活性进行研究。[方法]以驴骨粉为原料,酶法制备不同分子量驴骨肽,通过单因素及响应面优化得到最佳酶解条件,并考察其对成骨细胞MG-63中碱性磷酸酶活性的影响,确定具有抗骨质疏松活性的不同分子量驴骨肽的制备方法。[结果]确定了平均分子量为3 315 Da和797 Da的驴骨肽的制备方法,可使成骨细胞的碱性磷酸酶活性分别增加9.84%和9.83%。[结论]该研究确定了小于3 kD和大于3 kD这2个分子量段中具有最佳抗骨质疏松活性的驴骨肽的制备