了解2016年杭州地区重症手足口病(hand, foot, and mouth disease,HFMD)肠道病毒(enterovirus,EV)病原型别构成,探讨脑脊液检测在重症HFMD实验室诊断中的应用价值,寻求重症HFMD实验室检查关键指标。
方法收集杭州市儿童医院2016年3月至7月288例临床诊断为重症HFMD住院患儿,对上述患儿采集咽拭子进行EV核酸实时荧光定量反转录(reverse transcription, RT)-PCR ,同时抽取血和脑脊液进行肠道病毒71型(enterovirus A 71,EV-A71) 、柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirusA16,CV-A16)免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)抗体和脑脊液常规、生物化学检测。正态分布的计量资料采用t检验,非正态分布的计量资料采用Mann-Whitney U检验;计数资料采用χ2检验。
结果288例患者EV核酸总阳性率为83.7%(241/288),其中EV-A71阳性率为55.2%(159/288),CV-A16为4.9%(14/288),其他型别EV为23.6%(68/288)。68例其他型别EV检测结果显示,CV-A6为29.4%(20/68)、CV-A4为16.2%(11/68)、CV-A10为10.3%(7/68)。EV核酸联合血清和脑脊液EV-A71和CV-A16的IgM抗体检测总阳性率为98.3%(283/288),单纯EV核酸检测总阳性率为83.7%(241/288),两者总阳性率差异有统计学意义(χ2 =37.289,P=0.000)。EV-A71组患儿脑脊液有核细胞计数与CV-A16组、其他型别EV组比较差异均有统计学意义(Z值分别为-4.472和-9.991,均P<0.05);EV-A71组脑脊液有核细胞计数阳性率与CV-A16组、其他型别EV组比较差异均有统计学意义(χ2值分别为43.857和133.078,均P<0.05)。EV-A71组患儿脑脊液蛋白质水平与CV-A16组、其他型别EV组比较差异均有统计学意义(Z值分别为-3.151和-5.255,均P<0.05);EV-A71组患儿脑脊液蛋白质水平>400 mg/L的比例,与CV-A16组和其他型别EV组比较差异均有统计学意义(χ2值分别为4.956和11.795,均P<0.05)。脑脊液EV-A71 IgM抗体阳性组和阴性组患儿脑脊液有核细胞计数及阳性率比较差异均有统计学意义(均P<0.05);两组脑脊液蛋白质浓度及增高例数比较差异均有统计学意义(均P<0.05);两组脑脊液乳酸脱氢酶浓度比较有统计学意义(Z=-3.757,P=0.000)。血清与脑脊液EV-A71 IgM抗体有较好的相关性(r=0.600,P<0.05)。
结论2016年EV-A71仍是杭州地区重症HFMD最主要的病原体,CV-A6、CV-A4等其他型别EV重症病例较2014和2015年增多,脑脊液常规及脑脊液IgM抗体检测可以成为重症HFMD实验室关键指标。