【摘 要】
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目的 研究将饰胶蛋白聚糖 (decorin ,DCN)基因转染大鼠肾小球系膜细胞的可行性。方法 RT PCR法扩增大鼠DCN基因 ,构建重组真核表达质粒 pcDNA3.1A DCN ,采用脂质体将其转入
【机 构】
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复旦大学基础医学院病理学教研室!上海200032,复旦大学基础医学院病理学教研室!上海200032,美国北海岸LIJ健康机构放射肿瘤学部!纽约11030,复旦大学基础医学院病理学教研室!上海20003
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目的 研究将饰胶蛋白聚糖 (decorin ,DCN)基因转染大鼠肾小球系膜细胞的可行性。方法 RT PCR法扩增大鼠DCN基因 ,构建重组真核表达质粒 pcDNA3.1A DCN ,采用脂质体将其转入大鼠MsC ,经G418筛选阳性克隆 ,Westernblot及RT PCR法鉴定。结果 成功构建重组真核表达质粒 pcDNA3 .1A DCN ,转染MsC并筛选出 2个阳性克隆株。结论 构建载有DCN基因的MsC载体 ,为其开展对肾小球疾病模型的基因治疗提供了良好的实验基础
Objective To investigate the feasibility of transfecting decorin (DCN) gene into rat mesangial cells. Methods DCN gene was amplified by RT PCR. Recombinant eukaryotic expression plasmid pcDNA3.1A DCN was constructed and transfected into rat MsC by liposome. Positive clones were screened by G418, and identified by Western blot and RT PCR. Results The recombinant eukaryotic expression plasmid pcDNA3. 1A DCN was successfully constructed and transfected into MsC. Two positive clones were selected. Conclusion The construction of MsC vector carrying DCN gene provides a good experimental basis for gene therapy of glomerular disease model
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