81例假肥大型肌营养不良症患者基因突变分析

• 作 者: 李双 白莹 赵振华 孔祥东
• 机 构: 450052 郑州大学第一附属医院遗传与产前诊断中心,450052 郑州大学第一附属医院遗传与产前诊断中心,450052 郑州大学第一附属医院遗传与产前诊断中心,450052 郑州大学第一附属医院遗传
• 出 处: 中华医学遗传学杂志
• 发表日期: 2016年33期
• 关键词: 假肥大型肌营养不良 DMD基因 二代测序 阅读框规则

目的

对81例假肥大型肌营养不良症(Duchenne/Becker muscular dystrophy，DMD/BMD)患者进行基因突变分析，探讨中国河南人群DMD基因突变的特点。

方法

收集81例无亲缘关系DMD/BMD患者的临床资料，应用多重连接依赖式探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification, MLPA)对患者DMD基因进行外显子缺失/重复突变分析；对于MLPA检测为单个外显子缺失者，PCR扩增相应的外显子并进行Sanger测序以排除假阳性；对MLPA检测为阴性者，应用第二代测序(next generation sequencing，NGS)技术对79个外显子及其剪切位点进行测序，并用Sanger测序对微小突变进行验证。

结果

在81例DMD/BMD患者中，98.8%(80/81)检测出DMD基因缺失、重复或微小突变。MLPA技术检测出67例(82.7%，67/81)患者为DMD基因外显子缺失或重复突变，且第45～54外显子为缺失热点，其中79.1%(53/67)的患者临床表型符合"阅读框规则" ；NGS和Sanger测序检测出13例患者为DMD基因点突变，其中新突变6个，已知致病突变7个。新突变中1个为移码突变(c.4708-4709insTG)，5个为无义突变( c．8812G>T、c.2131A>T、c.6035T>A、c.3426C>A、c.3055C>T)。

结论

本研究结果丰富了DMD基因突变谱；MLPA、NGS和Sanger测序相结合的检测流程提高了DMD基因检测的敏感度和特异性，对于进一步的遗传咨询、产前诊断和基因治疗都有重要意义。