siRNA体外合成体系中GMP浓度优化及其对HeLa细胞端粒酶抑制的研究

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目的在小片段干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)体外合成的反应体系中加入不同浓度的GMP,比较RNA转录效率的高低,探讨siRNA体外合成体系中GMP的最佳浓度。并以该法合成的siRNA对肿瘤细胞端粒酶基因表达进行RNA干扰来验证其干扰效应。为简便、高效、低成本体外合成制备siRNA提供优化的实验条件,为广泛开展RNA干扰实验打下基础。方法以本实验室根据端粒酶hTERT基因(genebankgi:2347128)2653—2673位的核酸序列,构建的末端带T7启动子的部分双
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