天花粉蛋白的定点突变及聚乙二醇修饰

• 作 者: 安群星 雷迎峰 穆士杰 张献清 陈蕤 夏爱军 陈晨 易静 吴
• 机 构: 第四军医大学西京医院输血科,第四军医大学微生物学教研室
• 出 处: 中国生物制品学杂志
• 发表日期: 2008年3期
• 关键词: 天花粉蛋白 定点突变 聚乙二醇 修饰 Trichosanthin Site-directed mutation Polyethylene glycol M
• 基金项目: 陕西省科技计划项目（2003K10G9）,西京医院学科助推计划项目（XJZT07M09）.

目的对天花粉蛋白（Trichosanthin，TCS）进行定点突变及聚乙二醇（PEG）修饰，并对修饰产物进行DNA酶活性分析。方法选择TCS分子上可能的抗原决定簇位点（YFF81．83和KR173-174）进行定点突变，将所构建的两个突变体（TCSYFF81-83ACS和TCSKR173-174CG）在大肠杆菌中表达，并纯化表达产物。通过第82位和173位引入的半胱氨酸残基，分别对突变体蛋白进行PEG定点修饰。通过与突变型TCS比较，分析两个PEG修饰型TCS的DNA酶活性。结果突变的TCS经酶切鉴定及测