【摘 要】
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背景:已有相关研究报道,瘦素与细胞信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)表达异常在青少年特发性脊柱侧凸畸形发病中起重要作用.目的:探讨SOCS3是否通过瘦素信号传导通路调节软骨细胞内成骨活性.方法:①将人棘突软骨细胞分别以0(对照组),100μg/L瘦素刺激24 h,免疫组化染色观察Ⅱ型胶原表达.②将人棘突软骨细胞分9组培养,分别为空白对照组、转染pcDNA3.1-NC组、转染pcDNA3.1-SOCS3组、转染siRNA-NC组、转染siR
【机 构】
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南京医科大学第二附属医院骨科,江苏省南京市 210011
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背景:已有相关研究报道,瘦素与细胞信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)表达异常在青少年特发性脊柱侧凸畸形发病中起重要作用.目的:探讨SOCS3是否通过瘦素信号传导通路调节软骨细胞内成骨活性.方法:①将人棘突软骨细胞分别以0(对照组),100μg/L瘦素刺激24 h,免疫组化染色观察Ⅱ型胶原表达.②将人棘突软骨细胞分9组培养,分别为空白对照组、转染pcDNA3.1-NC组、转染pcDNA3.1-SOCS3组、转染siRNA-NC组、转染siRNA-SOCS3组、瘦素+转染pcDNA3.1-NC组、瘦素+转染pcDNA3.1-SOCS3组、瘦素+转染siRNA-NC组、瘦素+转染siRNA-SOCS3组.置于培养箱中培养24 h后,实时荧光定量PCR法检测SOCS3 mRNA的表达量,MTT法检测细胞抑制率.结果 与结论:①免疫组化染色显示,瘦素刺激组软骨细胞Ⅱ型胶原表达多于对照组.②实时荧光定量PCR检测显示,转染pcDNA3.1-SOCS3可显著提高软骨细胞SOCS3 mRNA表达量,转染siRNA-SOCS3可显著降低软骨细胞SOCS3 mRNA表达量,转染pcDNA3.1-NC、siRNA-NC对软骨细胞的SOCS3 mRNA表达量无影响;瘦素预刺激可提高转染pcDNA3.1-SOCS3、siRNA-SOCS3软骨细胞的SOCS3 mRNA表达量,对转染pcDNA3.1-NC、siRNA-NC软骨细胞的SOCS3 mRNA表达量无影响.MTT检测显示,转染pcDNA3.1-SOCS3可抑制软骨细胞内成骨活性,转染siRNA-SOCS3可增强软骨细胞内成骨活性;瘦素预刺激可提高转染pcDNA3.1-NC、pcDNA3.1-SOCS3、siRNA-NC、siRNA-SOCS3软骨细胞内成骨活性.③结果 表明,瘦素刺激可提高软骨细胞内成骨活性,SOCS3表达上调可通过瘦素抵抗抑制软骨细胞内成骨活性.
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