转基因肝癌细胞株BEL-7404／HBx的构建与鉴定

• 作 者: 林松挺 陈莹晖 陈正义 郑秀芳 郑健超
• 机 构: 中南大学湘雅医学院附属海口医院消化内科,海南医学院附属医院中心ICU
• 出 处: 中国现代医学杂志
• 发表日期: 2009年5期
• 关键词: HBV X基因 原发性肝细胞癌 细胞株 HBV X gene hepatoeellular carcinoma cell strain

目的构建稳定表达HBx的转基因细胞株BEL-7404／HBx，为进一步研究HBx对肝癌细胞BEL-7404生物学特性的影响，探讨HBx在原发性肝细胞癌（HCC）发生发展中的作用机制及HCC新的防治策略奠定基础。方法通过脂质体转染将亚克隆有HBVX基因的重组质粒pcDNA3．1（＋）-V5-HisB—HBx导入肝癌细胞系BEL-7404，并用G418筛选获取阳性克隆。分别用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和Westera-blot检测不同生长时期阳性克隆中HBx mRNA和HBx蛋白的表达情况。结果不同生