【摘 要】
：
目的构建表达大鼠TLR4 shRNA的慢病毒,并观察其对大鼠肺泡巨噬细胞TLR4的抑制作用和对内毒素(LPS)诱导的IL-6、IL-1β释放的影响。方法设计并构建4个可能具有干扰效力的shRNA
【机 构】
：
同济大学医学院附属东方医院心胸外科,
论文部分内容阅读
目的构建表达大鼠TLR4 shRNA的慢病毒,并观察其对大鼠肺泡巨噬细胞TLR4的抑制作用和对内毒素(LPS)诱导的IL-6、IL-1β释放的影响。方法设计并构建4个可能具有干扰效力的shRNA表达质粒,将他们分别与预先构建好的TLR4表达质粒共转染HEK-293T细胞,筛选出一段干扰效果最好的shRNA,使用Gateway的方法重组到慢病毒表达载体中并进行病毒包装和滴度测定,使用包装好的慢病毒感染大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383并加入LPS刺激,ELISA检测IL-1β、IL-6的释放情况。结果成功筛选出具有较高干扰效率的shRNA,并成功包装入慢病毒,慢病毒滴度为2.0×106TU/ml。转染慢病毒后的LPS诱导的肺泡巨噬细胞IL-1β、IL-6的释放均明显减少(P<0.05)。结论成功构建了表达大鼠TLR4 shRNA的慢病毒,具有良好的抑制IL-1β、IL-6表达的作用,为下一步动物体内实验基因治疗大鼠肺移植后的慢性排斥反应奠定良好的基础。
其他文献
新世纪十余年来,杜牧研究取得了可喜的成绩,无论在研究方法、研究角度较之以前都取得了显著的长进。杜牧研究的发展脉络、研究趋向所呈现的新特点,也是我们必须关注的。
作为一门综合的舞台艺术,戏曲表演集合了文学、艺术、舞蹈、美术于一身,体现出了不同的美学色彩。由于其独特的艺术表现形式,戏曲表演融合了传统文化和审美观,同时又加上不同
<正>绿化工程的施工管理就是采用科学的管理办法和手段使工程的实施在质量、安全、文明施工、工程进度等方面得到最佳的控制,以确保工程的顺利完成。只有做到实事求是、因地
<正>胫骨中下段骨折部位的软组织少、血运差,且多合并腓骨骨折。治疗可分为保守治疗和外固定或内固定等手术治疗,内固定又包括钢板螺钉、髓内钉等。目前,胫骨中下段骨折治疗
诚信是中华民族的传统美德,信用更是整个商务体系的关键环节,一切商业活动都是在诚信的基础上展开的。但由于互联网的虚拟性和技术上的一些漏洞,使得如今发展得如火如荼的电
目的:了解4个地区居民自我药疗行为的现状及其特点,分析影响4个地区居民自我药疗行为和自我药疗意愿的主要因素。方法:采用多阶段分层整群抽样的方法,对抽取的北京、西安、成
手枪射击是人民警察必须掌握的执法技能之一。手枪射击的据枪、瞄准、击发是有机联系的一个完整的射击动作过程。快速稳定的据枪，正确一致的瞄准，均匀正直的击发，三者正确的结合
目的:评价盐酸二甲双胍缓释片(美哒灵)治疗2型糖尿病的疗效及安全性。方法:2型糖尿病患者120例,随机分为4组:二甲双胍普通片1500mg,每次500mg,每日3次组;二甲双胍缓释片1500m
为了使所建立的气动力模型能准确地描述飞行器的动态特性,提出一种基于改进粒子群优化(IPSO)算法的小波神经网络(WNN)飞行数据气动力建模方法。该方法引入邻近粒子信息和变异
在软土地区或建筑物独立基础，由于毗邻建筑处基础限制无法扩展时，需要采用钢筋混凝土柱下条形基础。这种基础形式既可以增加基础刚度以减少地基变形，防止过大的不均匀沉降又可以