人 PPARγ基因过表达重组腺病毒载体的构建及鉴定

• 作 者: 李腾 李琼 严国强 储佳佳 沈小丹 温见炳 黄起壬 钟荣梅
• 机 构: 南昌大学药学院药理学教研室江西省基础药理学重点实验室,南昌大学期刊社
• 出 处: 南昌大学学报：医学版
• 发表日期: 2015年3期
• 关键词: 过氧化物酶体增殖物激活受体 重组腺病毒载体 基因重组 AdMax 腺病毒包装系统 peroxisome proliferator-activated recep
• 基金项目: 国家自然科学基金（81360060，81070633）；江西省主要学科学术和技术带头人培养计划项目（20123BCB22005）

目的：构建人的过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）基因的重组腺病毒载体。方法从人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中提取并扩增人 PPARγ cDNA 目的片段，将该目的片段经 AgeⅠ／NheⅠ酶切后插入经相同内切酶酶切后表达质粒（CMV-MCS-SV40-EGFP）得到重组穿梭质粒；再将该重组穿梭质粒与 AdMax 腺病毒包装系统的骨架质粒（pBHG loxΔE1，3 Cre）经 Cre／loxP 酶切重组，构建重组腺病毒（Ad-PPARγ）；最后，将 Ad-PPARγ感染HEK293T 细胞，进行病