目的 通过体外实验研究骨髓间充质干细胞（MSC）旁分泌肝细胞生长因子（HGF）对大鼠肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤的修复作用及其相关机理。方法获取和培养大鼠骨髓MSC；构建HGF siRNA质粒对MSC进行转染，将大鼠MSC进行相应的基因沉默；建立大鼠大鼠肾小管上皮细胞系NRK-52E（简称：NRK）缺氧复氧模型。在前述基础上，实验共分4组建立上下共培养体系，（1）对照组：将未进行缺氧复氧处理的NRK单独培养；（2）缺氧复氧组：将进行了缺氧复氧处理的NRK单独培养；（3）野生MSC组：上室中加入缺氧复氧后的NRK，下室中加入野生型MSC；（4）转染MSC组：上室中加入缺氧复氧后的NRK，下室中加入转染了HGFsiRNA的MSC。采用MTT法检测NRK增殖情况，采用实时荧光定量聚合酶链反应试剂盒检测各组HGF、HMGB1、IL-1β及TNF-α mRNA的相对表达量，采用蛋白质印迹法检测HGF、HMGB1、IL-1β及TNF-α蛋白的表达。结果MSC转染HGFsiRNA的效果较好，转染率在70％以上；转染HGFsiRNA后MSC的HGFmRNA表达水平显著降低。随培养时间的延长各组NRK均有增殖，培养32h时野生型MSC组NRK的增殖率最高，转染MSC组次之，缺氧复氧组最低（P〈0．01）。缺氧复氧组HMGBl、IL-1β及TNF-αmRNA的相对表达量均为最高，转染MSC组次之，野生MSC组最低，3组间两两比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。缺氧复氧组HMGB1、IL-1β及TNF-α蛋白的相对表达量均为最高，转染MSC组次之，野生MSC组最低，3组问两两比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论MsC通过旁分泌HGF对大鼠肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤具有明显的修复作用。
间充质干细胞通过旁分泌HGF减轻大鼠肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤的作用
【摘 要】
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目的 通过体外实验研究骨髓间充质干细胞（MSC）旁分泌肝细胞生长因子（HGF）对大鼠肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤的修复作用及其相关机理。方法获取和培养大鼠骨髓MSC；构建HGF siRNA质粒对MSC进行转染，将大鼠MSC进行相应的基因沉默；建立大鼠大鼠肾小管上皮细胞系NRK-52E（简称：NRK）缺氧复氧模型。在前述基础上，实验共分4组建立上下共培养体系，（1）对照组：将未进行缺氧复氧处理的NRK
【机 构】
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广州医科大学附属第二医院器官移植科,510260,广州医科大学附属第二医院器官移植科,510260,广州医科大学附属第二医院器官移植科,510260,广州医科大学附属第二医院器官移植科,510260,
【出 处】
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中华器官移植杂志
【发表日期】
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2014年35期
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