论文部分内容阅读
目的：制备蛋白转导结构域修饰小鼠干扰素-γ（PTD—mIFN-γ），为研究PTD—mIFN-γ，功能作准备。方法：以质粒pUC19／mIFN-γ，为模板，经3轮聚合酶链反应（PCR）扩增编码PTD—mIFN-γ片段，克隆于质粒pUC19上，测序鉴定正确后构建到pQE80L表达质粒载体中，经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后1．2％琼脂糖凝胶电泳鉴定．利用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）和Western blot法检测表达的目的蛋白，镍离子-次氨基三乙酸（Ni^2＋-NTA）凝胶亲和层析纯