【摘 要】
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CD4分子是辅助性T淋巴细胞表面的重要标志,广泛参与T细胞受体对主要组织相容性复合物Ⅱ(major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ)分子递呈抗原的识别和信号传递,与细胞免
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.31360594)
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CD4分子是辅助性T淋巴细胞表面的重要标志,广泛参与T细胞受体对主要组织相容性复合物Ⅱ(major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ)分子递呈抗原的识别和信号传递,与细胞免疫应答和防御机制紧密相关。本研究采用RT-PCR方法克隆牦牛(Bos grunniens)CD4的开放阅读框,通过实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)、Western blot及免疫组织化学链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物技术(streptavidin biotin-peroxidase complex method,SABC)检测成年牦牛的主要免疫器官(胸腺、脾、肠系膜淋巴结及血结)内CD4 m RNA及蛋白的表达。RT-PCR反应扩增得到牦牛CD4 m RNA序列编码区长为1 188 bp,编码396个氨基酸,与黄牛(Bos taurus)有较高的同源性。q RT-PCR和Western blot检测结果显示,CD4 m RNA及蛋白在各淋巴器官中均有表达,且在胸腺表达量最高,肠系膜淋巴结、血结次之,脾表达量最低(P<0.01)。免疫组织化学结果显示,CD4阳性细胞在胸腺皮质、髓质均有分布;在脾主要分布在动脉周围淋巴鞘和红髓髓索;在肠系膜淋巴结及血结内,则主要分布在淋巴小结周边及髓索。结果提示,牦牛胸腺是CD4阳性T淋巴细胞主要的输出器官,其输出量可能影响次级淋巴器官内T细胞含量;血结可能与淋巴结及脾一样,在细胞免疫发挥同等重要的作用。本研究为牦牛免疫遗传学和免疫生物学等相关研究奠定基础,同时也将为适时免疫、致病机理和疾病防治等研究提供新的资料。
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