【摘 要】
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钠离子通道结构域中的P环在通道的门控和离子选择性中起着重要作用。本文采用基因定点突变、电生理、定量PCR和Western bloting等实验技术,将钠离子通道Nav1.5结构域I中P环37
【机 构】
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江苏省分子医药生物技术重点实验室南京师范大学生命科学学院; 江苏省医药超分子材料及应用重点实验室;
【基金项目】
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南京师范大学优秀人才启动基金项目(2007104GJBO117);江苏高校优势学科建设工程项目(164320H106);国家自然科学基金项目(30570662,30871228)
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钠离子通道结构域中的P环在通道的门控和离子选择性中起着重要作用。本文采用基因定点突变、电生理、定量PCR和Western bloting等实验技术,将钠离子通道Nav1.5结构域I中P环375位高度保守的负电性谷氨酸残基(E375),分别突变为电中性的丙氨酸(A)、正电性的赖氨酸(K)和负电性的天冬氨酸(D),记录不同钠通道突变体在HEK293细胞中表达后的全细胞电流,并对其动力学性质进行了分析。结果显示,E375A和E375K突变体的全细胞钠电流显著减小,稳态激活曲线和稳态失活曲线发生改变;而E375D突变体的电流和稳态失活曲线则恢复至接近野生型的状态。上述结果表明,E375残基侧链所带负电荷对钠离子通道的电导和稳态失活过程起决定作用。
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